如何使用反向移液技術更的移取蛋白溶液

每支18新利备用官网的量程通常都用純水和正向移液技術校準過。因此我們(men) 推薦使用正向移液技術移取水性溶液，如緩衝(chong) 液，稀釋酸或堿。當移取不同於(yu) 水的液體(ti) 時，由於(yu) 具有不同的液體(ti) 特性，其移液量可能偏離所選的量程。比如 一些生物溶液的移液，可能會(hui) 在18新利备用官网或試管中產(chan) 生氣泡或泡沫，這將使移液量產(chan) 生偏差。在這種情況下，我們(men) 推薦使用反向移液技術移取高粘度或者容易產(chan) 生泡沫的液體(ti) 。反向移液技術減少了噴濺，泡沫和氣泡形成。這種方法尤其適用於(yu) 移取小體(ti) 積的液體(ti) 。

下麵先介紹一下正向移液和反向移液技術的操作。

1.將按鈕壓至*停點。

2.將吸頭浸入液麵下1cm處，緩慢釋放按鈕使其滑回原位。將吸頭從(cong) 液體(ti) 中移出，接觸容器邊緣除去多餘(yu) 的液體(ti) 。

3.排液時，吸頭緊貼容器壁先輕按按鈕至*停點，略作停頓後，將按鈕按至第二停點（這個(ge) 操作會(hui) 將吸頭內(nei) 的液體(ti) *排盡），將吸頭從(cong) 容器中沿容器壁移出。

4.鬆開按鈕至準備位置。

1.將按鈕壓至第二停點。

2.將吸頭浸入液麵1cm處，緩慢釋放按鈕使其滑回原位。這將時液體(ti) 充滿吸頭。將吸頭從(cong) 液體(ti) 中取出，接觸容器邊緣去掉多餘(yu) 液體(ti) 。

3.放液到接收容器時平穩地輕按按鈕至*停點。保持在這個(ge) 位置。一些液體(ti) 會(hui) 殘留在吸頭中不能被放出。

4.殘留在吸頭內(nei) 的液體(ti) 能夠被吹回原溶劑中或者同吸頭一起丟(diu) 棄。

5.鬆開按鈕到準備位置。

    選擇合適的18新利备用官网對於(yu) 微量移液的性也很重要。

    我們(men) 使用0.5-10 μl18新利备用官网，配合10ul吸頭，同時分別使用正向移液和反向移液，移取1%牛血清白蛋白（BSA，Sigma A7030）進行移液性測試。

圖1 表明當使用反向移液技術時，移液量的變化比使用正向移液技術處於(yu) 更狹窄的一個(ge) 範圍。

圖2 表明使用兩(liang) 種移液方式的不度。不度是估量移液的重複性的。反向移液技術可以使不度相對於(yu) 正向移液技術降低50%。

    這是因為(wei) ，BSA溶液含有易被疏水18新利备用官网吸頭壁吸附的疏水成分。當使用正向移液技術時，每次移液後少量的液體(ti) 易殘留在吸頭中。這種趨勢會(hui) 增加吹出液體(ti) 體(ti) 積之間的偏差，因為(wei) 當重複移液時吸頭中累積的殘餘(yu) 液體(ti) 可能增加下一次移液的移液量。而反向移液技術中有額外的液體(ti) 被吸入吸頭中，這些額外的液體(ti) 作用似一個(ge) 蓄水池它使連續移液的移液量均等。這個(ge) 蓄水池也能阻止空氣在吹出液體(ti) 的zui後從(cong) 吸頭口進入，這樣可以降低液體(ti) 起泡的可能性。這使反向移液技術在移取小液量液體(ti) 時尤其有用。由此可見，采用反向移液技術，可較好的提高移取蛋白溶液的度和重複性。